湿热灭菌法是用饱和水蒸气、沸水或通蒸汽行灭菌的方法，以温压水蒸气为介质，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，导致微生物的死亡，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法，是药物制剂过程中常用的灭菌方法。

原理

湿热灭菌的原理是使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。这种变形是分子中的氢键分裂，当氢键断裂时，蛋白质及核酸内结构被破坏，而丧失了原有能。蛋白质及核酸的这种变形可以是可逆的，也可以是不可逆的。虽然无所谓动能行结构被破坏，若氢键破裂的数量未达到微生物死亡的临界值，则其分子很可能恢复到它原有的形式，微生物就没有被杀死。为有效地使蛋白质变形，如采用压蒸汽灭菌时，就需要水蒸气有足够的温度和持续时间，这对灭菌效果十分重要。温饱和水蒸气可迅速使蛋白质变形，在规定操作条件下，蛋白质发生变形的过程即微生物死亡的过程，是可预见和重复的。微生物的灭活符合动力学方程，微生物死亡速率是微生物耐热参数D和杀灭时间的函数。即在给定的时间下被灭活的微生物与仍然存活数成正比。

LgNt=lgNo-F(T,Z) /DT

Nt:t分钟后微生物计数值;

No:初始微生物计数值;

DT:在T温度下的微生物降低个对数单位所需要的时间，分钟;

F(T，Z):灭菌程序在确定温度系数Z的T温度的等效灭菌时间。

湿热灭菌的方法

影响湿热灭菌的主要因素有:微生物的种类与数量、蒸汽的性质、药品性质和灭菌时间等。

(1)通蒸气灭菌法:是在常压条件下，采用100摄氏度通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。该法适用于消毒以及不耐热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。

(2)间歇蒸汽灭菌法:利用反复多次的通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽胞。方法同通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。若被灭菌物不耐100℃温，可将温度降至75℃~80℃，加热延长为30~60分钟，并增加次数。适用于不耐热的含糖或牛奶的培养基。

(3)压蒸汽灭菌法:103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟。

湿热灭菌法 湿热法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果，因为:①湿热中蛋白吸收水份，更易凝固变性;②水分子的穿透力比空气大，更易均匀传递热能;③蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可迅速提物体的温度。

湿热灭菌法般采用121℃，灭菌20-30min，如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时，再灭菌次，以用于杀死刚刚萌发的孢子。