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分子杂交仪原理和操作

发布时间:2019/8/21   点击次数:836
 
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分子杂交仪广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。

原理

分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。

核酸分子杂交是基因诊断的基本的方法之。它的基本原理是:互补的DNA单链能够在定条件下结合成双链,即能够行杂交。这种结合是异的,即严格按照碱基互补的原则行,它不仅能在DNA和DNA之间行,也能在DNA和RNA之间行。因此,当用段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两者的碱基配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。由此可见,行基因检测有两个条件,是需的异的DNA探针;二是需的基因组DNA。当两者都变性呈单链状态时,就能行分子杂交。

操作步骤

1.接通电源打开开关,行参数设定。参数设定,接通电源→按"选择"键到相应的参数行→按"设定"键,该行位开始闪烁,入修改状态→按"置数"键,数字0~9循环到达所需的数字后按"移位"键到下位数字修改后,按"设定"键确认。按"选择"键可选择修改其他数据或回到正常显示状态。

2.达到所设定的温度后按"运行"键试运行30min。

3.按"停止"键然后将所要杂交的东西放到仪器内按"运行"键开始运行。

 
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